硕士论文可以放Elisa标准曲线吗?
1,样品的浓度等指标都是根据标准曲线计算出来的,所以首先做标准曲线比做形式实验更重要,否则后面的实验结果就无从谈起。
2.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有比较大的跨度,并且要覆盖你要测试的实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围内,包括上限和下限。对于S形标准曲线,尽量使实验样品的浓度在中间斜率最陡的一段,即曲线几乎呈直线。
3.标准曲线中标准样品的浓度最好用倍数稀释法配制,酶联免疫试剂盒可以保证标准样品的浓度不会出现较大偏差。
4.测试标准样品时,应按浓度递增的顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确度。
5.标准曲线的样本数一般为7点,但至少要保证5点。
6.标准曲线的相关系数随实验要求的不同而不同,但一般来说,相关系数r至少要大于0.98,对于某些实验,至少要达到0.99甚至0.999。
第二,选择拟合什么方程。
在S曲线的低浓度段可以很好的拟合幂方程,中低浓度段可以用线性方程,中间段可以用对数方程,中后期可以用四参数。免疫测定中刻度点(可以是倍数比)
稀释,或者不稀释)如果浓度和对应的吸光度(OD)值能呈现线性关系,当然是最理想的。这时候可以通过EXELL等人很容易的得到拟合曲线,然后进行计算。
样本的浓度值。
关于刻度曲线的拟合方法,虽然直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数都可以用于ELISA等生物反应中的曲线拟合,但都是只用于曲线的一部分,有的用于前半部分,有的用于后半部分,有的用于中间部分,而Logistic曲线都是适用的。
在一个较长的时间间隔内,逻辑应该能够完美地拟合。如果用于量化,S形曲线的中段(陡峭部分)较好,而两个实平坦部的计算误差会较大,有时
甚至会很大。所谓的用于免疫分析的“刻度曲线”实际上叫做拟合曲线。目前国际上最流行的免疫分析拟合方法是“四参数逻辑拟合”,它往往可以
能够准确反映浓度与吸光度之间的曲线关系,从而进一步准确获得样品中待测物质的浓度值。但是我们做免疫分析的时候很少有这么理想的情况,标准品的浓度。
而对应的OD值往往是一条“S”型曲线,这时候就不能用直线拟合的方法了,需要选择拟合的方法。关键在于你的刻度曲线的哪一部分是S形的。
曲线的哪一部分是您要测试的样品浓度?当然,如果用于量化,还是放在中段比较好。但建立模型是一回事,用ELISA试剂盒定量又是另一回事。这些方法是可靠的
但是,没有一种方法可以放之四海而皆准,但都可以用。但不代表它是万能的。其实不仅是ELISA,很多其他生物反应都是S型曲线,也可以用Logistic曲线拟合。